Real-time PCR 技术,是通过在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化实时监测PCR 扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,对起始模板进行定量分析的方法。实验采用两种定量方式,即绝对定量和相对定量。荧光定量PCR 可用于mRNA 表达量水平检测、MicroRNA 表达量水平检测和基因拷贝数检测。实验的方法可分为SYBR Green I 法和TaqMan探针法。
实验流程:
1. 根据客户提供基因序列设计引物;
2. 提取样品总RNA,并反转录成cDNA;
3. Real-Time PCR,进行实验结果分析。
服务内容:
1、基因组DNA水平基因拷贝数检测
2、转录组mRNA水平基因拷贝数检测
3、转录组miRNA水平基因拷贝数检测
客户提供材料:
1)细胞:细胞数>106;
2)组织:总量>100 mg;
3)DNA 或RNA 样品:总量>2 μg;
4)靶基因信息:包括基因序列或GenBank Accession Number 等;背景资料:包括生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。
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