一、收到原代培养的细胞后应该有哪些注意事项?
显微镜下观察细胞状态,看是否有细胞脱落、漏液和污染等异常情况,然后仔细阅读产品说明书,因不同品牌、不同种属、不同类型的细胞其培养技巧存在些许差别,客户收到细胞后,请务必仔细阅读随货附赠的说明书,切记不可仅凭经验操作。
通常,我们可以从说明书中获取以下重要信息:
(1)细胞数目
(2)细胞增殖能力
(3)推荐培养基、培养器皿及包被液
(4)推荐接种密度
(5)复苏、培养、传代等操作步骤
(6)运输、储存及培养条件
二、原代细胞的传代周期和传代次数怎样确定?
原代细胞一般是采用“倍增次数”来描述细胞生长潜能的,一次细胞倍增是指细胞总数增长为原来的2倍,一次传代通常是指将一瓶细胞扩增至2-3瓶。由于不同物种、组织来源、细胞类型和体外培养条件等因素的影响,原代细胞“倍增次数”可能会有很大差异,所以对某些原代细胞的传代周期和传代次数需进行具体分析。
三、欣润生物的原代细胞,是否需要特定的包被液包被培养瓶/皿?
欣润生物的大多数细胞可以在不使用包被液的情况下自行贴壁。然而仍有部分细胞类型需要使用指定的包被材料。具体情况请参见说明书中相应部分的内容。
四、如何计算大鼠胰岛的IEQ值?
一般情况下,直径大小为150um 的胰岛细胞 = 1 IEQ.
胰岛 IEQ 对照表:
直径大小(um) | IEQ值 |
50-100 | 0.17 |
101-150 | 0.67 |
151-200 | 1.7 |
201-250 | 3.5 |
251-300 | 6.3 |
301-350 | 10.4 |
351-400 | 15.8 |
>400 | 22.7 |
显微镜下记录细胞大小和数量后,请按以上对照表计算,再乘以稀释倍数就是总的IEQ值。
例如:您从3ml细胞悬液中取出50ul,观察计数后得出:
50-100 um 有5个胰岛
101-150 um 有3个胰岛
151-200 um 有2个胰岛
201-250 um 有4个胰岛
那么总的IEQ值=60×(0.17×5+0.67×3+1.7×2+3.5×4)=1215.6 IEQ