细胞永生化(Cells Immortalization)是指体外分离培养的原代细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离，从而具有无限增殖能力的过程。正常组织来源的原代细胞在通常的体外培养条件下可分裂生长，但经过有限次数的传代后，就会停止增殖，发生衰老和死亡。利用基因转染等技术将外源性永生化基因导入目的细胞内，从而建立永生化细胞株，以达到使体外培养的细胞具有无限增殖能力且细胞间无差异的目的。对细胞永生化进行深入研究，不仅有利于对细胞增殖与衰老的分子机制了解，而且为探寻肿瘤治疗及器官移植的研究奠定了坚实的基础。此外，由于永生化细胞具有可以多次传代的特性，可以利用各种细胞永生化的方法使那些传代困难、增殖缓慢、容易衰老的细胞获得永生，从而为研究人员提供更多的细胞资源。

  细胞永生化构建方法：（1）使用SV40T基因，诱导细胞不朽化。SV40的T抗原诱导不同类型的细胞不朽化，在许多文献中己证实，此方法为简单且可靠的方法，其机制一直都有详细记载。（2）大多数体细胞的端粒缩短至关键长度 ,就会发生细胞生长障碍或细胞衰老 ;肿瘤细胞因有端粒酶活性而使其具有无限分裂的能力。人类催化亚基端粒酶逆转录酶( human telomerase reverse transcriptase , hTERT)是端粒酶的限速成分,仅在端粒酶阳性的细胞中表达,与端粒酶活性相关。研究发现，hTERT共转染P53或pRB siRNA可以使人类细胞，原代细胞，卵巢细胞，及上皮细胞永生化。（3）人乳头状瘤病毒( human papilloma virus，HPV) 是一种对上皮细胞具有高度特异性的DNA肿瘤病毒，该病毒会引起细胞增殖，将正常细胞转化成乳头状瘤细胞。在HPV编码基因中，占基因组50%的早期区表达蛋白含有E1—E8 8个阅读区，其中E6和E7两个阅读区编码相应蛋白，可以改变细胞的末期分化，使细胞逾越保证DNA复制和染色体分配质量的检查机制，从而使细胞永生化。所以E6和E7两个阅读区在细胞永生化中起到了关键作用。有实验表明被HPV感染的上皮细胞内端粒的长度停止缩短并不断增长，使细胞达到永生化。(4) EBV是疱疹病毒(Epstein-Barr virus)，EBV在体外能和培养的B淋巴细胞融合，进而感染B淋巴细胞，使基因通过显性表达改变细胞周期,使其正常细胞形成永生化的淋巴细胞系。

  欣润生物的研究团队拥有多年原代细胞分离培养及细胞永生化服务研究经验，已经成功建立了多种永生化细胞株，包括人源、羊源、牛源、鼠源、猪源、兔源及部分家禽源等细胞。引进其先进的细胞永生化定制平台，依靠多位经验丰富的研究人员，能够为国内科研工作者提供专业的永生化细胞定制服务。您可以提供自主分离的特定原代细胞，也可以从我们的原代细胞产品中选择合适的目的细胞。

交付内容

提供经过特定标记鉴定的永生化细胞（1个T25方瓶细胞和2管冻存管细胞）、实验原始数据及实验报告。

服务周期

在获得对方提供的或指定使用的原代细胞前提下，6-8周完成。

部分原代细胞永生化技术服务已发表文献引用：

（1）Platelet membrane-coated alterbrassicene A nanoparticle inhibits calcification of the aortic valve by suppressing phosphorylation P65 NF-κB

期刊：Theranostics

DOI:10.7150/thno.85323

影响因子：11.55

（2）The role of SFRP1 in human dermal papilla cell growth and its potential molecular mechanisms as a target in regenerative therapy

期刊：Regenerative Therapy

DOI:10.1016/j.reth.2024.12.001

影响因子：3.5

（3）Cytokine CCL7-mediated activation of mesenchymal stem cells to promote urinary continence via periurethral |broblasts mechanism

期刊：Research Square

DOI:10.21203/rs.3.rs-2567895/v1